Автореферат и диссертация по медицине (14.00.24) на тему: Состояние этанокисляющих ферментных систем при смертельных отравлениях алкоголем (критерии судебно-медицинской диагностики)
Автореферат диссертации по медицине на тему Состояние этанокисляющих ферментных систем при смертельных отравлениях алкоголем (критерии судебно-медицинской диагностики)
На правах рукописи
ПОРОДЕНКО Валерий Анатольевич
ФЕРМЕНТНЫХ СИСТЕМ ПРИ СМЕРТЕЛЬНЫХ ОТРАВЛЕНИЯХ АЛКОГОЛЕМ (критерии судебно-медицинской диагностики)
14.00.24 — судебная медицина
диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук
Работа выполнена в Кубанской государственной медицинской академии
Заслуженный деятель науки РФ
доктор мед. наук, профессор В. В. ТОМИЛ И Н.
Гурочкин Юрий Дмитриевич — доктор медицинских наук,
Крюков Виталий Николаевич — доктор медицинских наук,
Туманов Владимир Павлович — доктор медицинских наук,
Ведущая организация — Московский медицинский стоматологический институт.
Защита состоится «. ■» ^ЛЛЛИл^А^ 1 С)р7 г з_час.
на заседании диссертационного совета Д 074. 03. 01. Республиканского центра судебно-медицинской экспертизы по адресу: 123242, г. Москва, ул. Садово-Кудринская, 3, корп. 2.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Республиканского центра судебно-медицинской экспертизы.
Автореферат разослан _алМс^я^-_ 1997 г
Ученый секретарь диссертационного совета
кандидат медицинских наук О. А. ПАНФИЛЕНКО.
Актуальность темы. Неуклонный рост алкоголизма ставит задачу дальнейшего углубления знаний в области его этиопатогенеза. диагностики и лечения. Несмотря на многочисленные и разнообразные законодательные, административные и общественные меры, достигнутые в этом направлении результаты значительными назвать нельзя. Этиловый алкоголь неизменно держит первое место в структуре смертельных отравлений, составляя 58-7255 и более (А.П.Громов.А.В.Капустин. 1982; А.Ф.Рубцов. 1980,1989; В.В.Томи-лин с соавт.,1981-1988 и др.). поэтому разработка вопросов экспертизы алкогольных интоксикаций обозначена в числе наиболее важных задач судебной медицины (А.В.Капустин.1987; В. В. То-милин.Ю.И.Соседко.И.И.Леонидов. 1987; В.В.Томилин, А.В.Капустин. 1996). Как причина смерти последствия 'от злоупотребления спиртными напитками занимают в мировой статистике четвертое место, уступая сердечно-сосудистой патологии, онкологическим заболеваниям и травмам. Не является исключением и Краснодарский край, где ежегодная смертность от отравлений этанолом в последние годы приближалась к тысячной отметке, а в 1993 году превысила ее и в 1994 году составила 1290 случаев.
Судебно-медицинская диагностика отравлений этиловым алкоголем в повседневной экспертной практике до сих пор основывается преимущественно на результатах судебно-химического исследования. с учетом секционных и патогистологических данных. Такой подход не позволяет учитывать ряд важных факторов : индивидуальную чувствительность к этанолу, обусловленную биологическим состоянием ферментных систем, изменение толерантности организма и влияния на танатогенез кумуляции эффекта при систематическом употреблении спиртных напитков, роль фоновых заболеваний сердечно-сосудистой системы, печени, почек и др.
В последние годы большое внимание уделяется поиску маркеров алкоголизма (А.Е.Успенский, 1986). Предлагается использовать
биохимические показатели содержания алкогольдегидрогеназы и альдегиддегидрогеназы (В.М. Гуртовенко,1975; Б. М. Кершенгольц и др., 1980,1981; М. С. Усатенко, М.А.Петрова,1985); аспартатами-нотрансферазы (Л.Ф.Панченко и др.,1982; И.Н.Пятницкая.1987; Т.В.Чернобровкина и др.,1988; S.Holt et al.. 1981; L.Shaw. 1982) и др. Возлагались надежды на диагностическую значимость аце-"тальдегида (В.Е.Высокогорский и др..1980; К.Н.Груздева и др. ,1980; J.P.Wartburg,1984; H.Nuutinen. K.O.Lindros, М.Salas-puro, 1983,1984) и продуктов его конденсации с тетрагидроизохи-нолинами (A.Stowell and oth..1984; H.Maurlce and oth..1985; D.W.Myers and oth..1984,1985). Однако применение их затрудняется быстрым посмертным разрушением энзимов и высокой реактивностью ацетальдегида с образованием разнообразных соединений, поиск которых в трупном материале представляет значительные трудности (C.Erlksson,1977; A.Stowell et al.,1984). а полученные количественные показатели ' нельзя признать надежными (М.Thomas.T.S.Peters,1981; К.Homaldan Fadla and oth. .1984).
Выполненными на кафедре ранее исследованиями (Н. И.Репе-тун.1985; Т.П.Перова,1986) показано, что уровень содержания этанола в крови не является решающим в диагностике смерти от отравления алкоголем; для установления причины ее наступления требуется проведение всестороннего анализа, важное место в котором занимают патогенетически обоснованные методы изучения ферментных систем метаболизма алкоголя. Они особенно незаменимы в случаях хронической алкоголизации, когда при выраженных ферментативных нарушениях изменения внутренних органов в ряде случаев носят'своеобразный характер скрыто протекающей алкогольной болезни (К.С.Митин, М.Е.Березовский. Л.С.Лапина. 1990). Это и наблюдается в экспертной практике в отличие от патологоанатомической, где выявляется грубая характерная органная патология (Г.Г.Автандшюв, 1985; С.П.Лебедев, 1985).
Выяснение характера изменений алкогольокисляющих ферментных систем (АОФС) - алкогольдегидрогеназной (АДГ), каталазно-пе-роксидазной (КТ-ПО) и микросомальной этанолокисляющей (МЭОС) -"позволит уточнить варианты танатогенеза отравлений алкоголем и повысить качество судебно-медицинской диагностики.
Целью работы явилось изучение состояния алкогольокисляющих ферментных систем при отравлениях этанолом, алкогольной карди-омиопатии (АКМП) и ишемической болезни сердца (ИБС) для повышения качества судебно-медицинской диагностики.
Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
1) изучить влияние этанола на активность алкогольокисляющих ферментных систем (АОФС) при остром отравлении и на фоне хронической алкоголизации в модельных опытах на животных;
2) провести исследование АОФС печени, миокарда и почек у лиц. погибших от отравлений этиловым алкоголем;
3) сравнить полученные данные с результатами изучения АОФС при внезапной смерти от ИБС и АКМП;
4) исследовать морфофункциональное состояние печени при отравлениях этанолом, смерти от алкогольной кардиомиопатии и ишемической болезни сердца комплексом патоморфологических, га-зохроматографических и гистохимических методов;
5) исходя из анализа полученных данных комплексного пато-морфологического, судебно-химического и гистохимического исследований. дать предложения по совершенствованию судебно-медицинской диагностики смертельных алкогольных интоксикаций.
Новизна результатов. Впервые в судебной медицине на.основе гистохимического исследования АДГ, НАДФ-Д и КТ-ПО печени, миокарда и почек в экспериментальных исследованиях и на материале судебно-медицинских экспертиз:
1) разработан метод компьютерного ыорфометрического анализа микроскопических объектов, принципы количественной и качественной оценки результатов гистохимических реакций на АДГ, НАДФ-Д и КТ-ПО;
2) проведено изучение активности АОФС при смерти от острого отравления этанолом и на фоне хронической алкоголизации, от АКМП и ИБС; проанализирована частота встречаемости патоморфологических проявлений в печени, миокарде и почках;
3) получены данные о морфофункциональном состоянии печени комплексным патоморфологическом, гистохимическим и газохрома-
тографическим исследованиями; сопоставлены патоморфологические изменения с концентрацией этанола в отделах венозной системы и активностью АОФС в структурах ацинусов печени;
4) даны предложения по совершенствованию судебно-медицинской диагностики смертельных алкогольных интоксикаций, с использованием современного компьютерного гистохимического исследования состояния АОФС.
Научно-практическая значимость работы. Предложен метод компьютерного морфометрического анализа и принципы количественной и качественной оценки результатов гистохимических реакций на АДГ, НАДФ-Д и КТ-ПО. Выполненное гистохимическое изучение АОФС, в сопоставлении с данными патоморфологического и су-дебно-химического исследований, позволило расширить представление о вариантах танатогенеза отравлений этанолом и дать предложения по совершенствованию дифференциальной диагностики со смертью от АКМП и ИБС для экспертной практики. Результаты могут использоваться в дальнейших научных исследованиях.
По материалам диссертации опубликована 21 работа, издано информационное письмо, получено удостоверение на рационализаторское предложение. Основные положения доложены на 1-й Международной конференции судебных медиков (г.Астрахань.1995), двух заседаниях Краснодарского отделения ВОСМ (1993.1995) и совместном заседании Краснодарского отделения ВОСМ с кафедрой судебной медицины КГМА (1996).
Объем и структура работы. Диссертация написана на 350 страницах машинописи, содержит 53 таблицы. 72 графика. 8 микроскопических изображений гистохимических реакций. Состоит из введения. обзора литературы. 5 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 647 источников. 444 из которых на русском языке и 203 иностранных авторов, приложения.
Весь материал, представленный в диссертации, обработан и проанализирован автором лично.
На защиту выносятся следующие положения:
1. Концентрация этилового спирта в крови и патоморфологи-ческие признаки не являются бесспорными доказательствами смертельных алкогольных интоксикаций. Возможности судебно-медицинской диагностики существенно расширяются с использованием гистохимических показателей состояния алкогольокисляющих ферментных систем - АДГ. НАДФ-Д и КГ-ПО. которые позволяют учитывать индивидуальную толерантность к этанолу, обусловленную причинами врожденного и приобретенного характера, и одновременно оценивать патоморфологию органа.
2. Проведение судебно-медицинской экспертизы при подозрении на отравление этиловым алкоголем должно носить характер комплексного патоморфологического, судебно-химического и гистохимического исследования. Для оценки морфофункционального состояния печени целесообразно анализировать активность АДГ. НАДФ-Д и КТ-ПО по ходу детоксикации этанола в 1-3 зонах ацинусов печени, в миокарде и почках, качественные и количественные показатели в которых отличаются при остром отравлении и на фоне хронической интоксикации этанолом, при алкогольной кардиомио-патии и ишемической болезни сердца. Важное диагностическое значение имеет раздельное определение концентрации этанола в крови из бедренной, воротной и нижней полой вен.
3. Комплексное патоморфологическое. судебно-химическое и гистохимическое исследование позволяет раскрыть варианты тана-тогенеза при алкогольных интоксикациях, алкогольной кардиомио-патии и ишемической болезни сердца, которые имеют индивидуальный характер и зависят от наличия и степени выраженности фоновой патологии, характера спиртных напитков, продолжительности и систематичности их употребления, генетически детерминированной активности АОФС и других причин. Анализ состояния АОФС. в сопоставлении с данными о патоморфологических изменениях во внутренних органах и концентрации этанола в отделах венозной системы и моче, дает возможность учесть в каждом случае инди-видульные особенности организма и объективизировать экспертные выводы о причине наступления смерти.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для решения поставленных цели и задач научной работы выполнены экспериментальные исследования на 357 белых беспородных нелинейных крысах-самцах, распределенных в 4 группы:
1) острое отравление этанолом - 50;
2) хроническая интоксикация этанолом - 108;
3) отравление на фоне хронической алкоголизации - 154;
4) контрольная группа - 45.
С целью отбора животных в группу хронической алкоголизации они были поставлены в условия свободного выбора (А.X.Абдрашитов, 1984). с учетом ряда рекомендаций (А.Б.Кампов-Поле-вой, 1980,1982; Р. В. Бережной. 1982; Ю. В. Буров и др., 1983-1985; А.Е.Успенский,1984; М.Н.Захарова,Л. В. Митина,1987; О.П.Кашевс-кая с соавт.. 1988). Масса животных составляла 150-230 граммов.
Животные, подлежавшие экспериментальному острому отравлению этанолом, получали обычную диету, для полной эвакуации содержимого из желудка в день накануне опыта голодали. Группа хронической алкоголизации в течение 24 недель получала вместо воды этиловый алкоголь в возрастающей концентрации : 1%, 5%, 10%, 15%, 20%; в дальнейшем переводилась на получение 10% раствора этилового спирта в течение 6-12 месяцев.
Для моделирования отравления интактным и хронически алкого-лизированным животным вводили через зонд 40% раствор этанола из расчета 21,3 мл абсолютного алкоголя на 1 кг массы (А.Мо-п1с,1968). С учетом полученных рядом исследователей в эксперименте данных о высоком уровне "базального" метаболизма этанола у крыс ( А.Х.Абдрашитов,1984), применяли самую высокую дозу ЛД 50 из указанных в отечественной и зарубежной литературе.
Перед выполнением экспериментов проведена серия опытов по модификации способа подготовки тканей внутренних органов для постановки гистохимических реакций. Основной целью явился выбор лучшей промежуточной среды, подбор оптимальной охлаждающей температуры и префиксатора, которые обеспечивали бы хорошую выявляемость ферментов, максимально сохраняли структуру тканей и снижали влияние липидов на ход гистохимических процессов. В
качестве испытуемых промежуточных сред нами были использованы рекомендуемые Т.В.Журавлевой.Р.А.Прочухановым (1978) бензин и изопропан, а также ацетон. В результате сравнительного изучения в нескольких опытных сериях на экспериментальном и секционном материале мы пришли к заключению, что применительно к нашим методикам наилучшие результаты дает ацетон (рац. предложение N 838 от 12.10.88 г.). При фиксации в нем препараты имели хорошую гистологическую структуру, четкое стабильное воспроизведение формазановых гранул, достигалось наилучшее обезжиривание срезов. Это позволило также повысить стандартизацию методик, поскольку ацетон применяется нами для фиксации криос-татных срезов и обезжиривания предметных стекол.
Гистохимическое исследование на АДГ выполняли методом Hess, Scarpelll, Pears (1958) в модификации Т.П.Перовой (удостоверение на рац. предложение N 512 от 12.04.83 г.). Реакцию на маркерный фермент МЭОС - НАДФ-Д проводили по Hess. Scarpelll, Pears (1958). Об активности АОФС судили по интенсивности форма-зановой реакции с красителем - тетранитросиним тетразолием. Активность KT выявлялась разработанным на кафедре ортодианизи-динового метода (А. Ю.Резников,Т.П.Перова, В. А. Породенко.1987). Параллельно производили окраску срезов тканей гематоксилин-эозином, Суданом 3 и Суданом черным В по стандартным методикам.
Полученные в экспериментах данные сопоставлены с результатами судебно-медицинских экспертиз в случаях смертельных отравлений алкоголем (45), ИБС (17), АКНП (9). а также ЧМТ (29) и механической асфиксии (8) в качестве контроля (табл.1).
Оценку активности АОФС проводили методом количественной морфометрии продукта гистохимических реакций. Ввод микроскопических изображений срезов внутренних органов в компьютер осуществляли с помощью платы фрейм-граббера "Октет 512". установленной на ПЭВМ IBM 286-12/16 РХ-116 G, и телеустановки ПТУ-61. сопряженной с МБИ-15. Контроль за поступлением телевизионного сигнала вели по экрану отдельного телемонитора. Ввод телесигналов выполняли программными пакетами записи и анализа графических изображений "IML" и "NASA".
Для выполнения количественной морфометрии и первичной ста-
Распределение секционного материала по причинам смерти
N/N Причина смерти Кол и ч е с т в 0
п/п мужчины женщины всего
1. Отравление этанолом 43 2 45
2. Черепно-мозговая травма 22 7 29
3. Ишемическая болезнь сердца 15 2 17
4. Алкогольная кардиомиопатия 9 - 9
5. Механическая асфиксия 8 - 8
тистической обработки полученных данных применяли специально разработанную нами компьютерную программу "Morfolog", позволяющую вычислять площадь и оптическую плотность (ОП) продуктов гистохимических реакций по 16 и 256 градациям цвета. Сканниро-вание изображений осуществляли по 16 цветовым градациям ОП - с О по 15. Для АДГ и НАДФ-Д ОП формазана находилась в пределах шести градаций - с О до 5; продукт гистохимической реакции на КТ-ПО занимал семь градаций цвета и для удобства обработки был объединен в 4 группы. Компьютерная математическая обработка данных морфометрии велась с десятичным логарифмированием.
Количественные и качественные преобразования продукта ферментативных реакций оценивали, исходя из ацинарного строения печени (A.Rappaport,1982), поскольку традиционно сложившееся в экспертной практике анатомическое дольковое представление о структуре органа не позволяет понять сущность морфофункцио-нальных изменений, развивающихся при патологических процессах.
Полученные цифровые данные подвергнуты компьютерной статистической обработке для вычисления средней арифметической (М), средней ошибки средней арифметической (м). показателя степени достоверности (р).
Оценка данных экспериментальной алкоголизации.
Анализ данных эксперимента позволяет сделать вывод, что для каждой группы животных динамика АОФС имеет определенные закономерности. В табл.2 приведены показатели общей активности АДГ, НАДФ-Д и КТ-ПО по результатам компьютерной количественной морфометрии гистохимических препаратов печени, миокарда и почек; рассчитаны также значения относительно контроля.
При остром отравлении этанолом (00Э) определяется выраженное снижение АДГ относительно контроля - почти в 2 раза: значения в 1-3 зонах ацинусов печени одинаковы (в контроле пропорционально уменьшаются). Изменяется качественный состав продукта гистохимической реакции - почти в 3 раза падает формазан высокой оптической плотности, с прогрессивным уменьшением от 1 к 3-ей зоне ацинусов. Такие же относительные значения АДГ обнаруживаются в миокарде и почках. Продукт низкой ОП превышает показатели высокой в печени в 5.2 - 6,3 - 8.4, в миокарде - в 5.6, в почке - в 5,4 раза. В контроле это соотношение носит другой характер: в печени 1,4-3,3-6,3, в миокарде - 1,5, в почке - в 1.5. При графическом моделировании активности АДГ в этих группах эксперимента кривые линейной зависимости резко отличаются : если в контроле наблюдается прогрессивное резкое снижение отрезков кривой на уровне отметок портальных трактов, балок и центральных вен. то при 003 начало графика имеет вид горизонтальной линии с последующим резким снижением к отметке миокарда и таким же крутым подъемом к значению почек (рис.1).
При хронической интоксикации этанолом (ХИЭ) падение АДГ еще более выражено - в 3,5 раза относительно контроля. В структурах ацинусов печени фермент уменьшается от 1 к 3-ей зонам, как и в контроле. Количество формазана высокой ОП становится ниже контрольных значений в 3,5 раза в гепатоцитах портальных трактов, почти в 2 раза - в клетках печеночных балок. Вместе с тем, в окружности центральных вен АДГ не только не снижается, но даже несколько превосходит контрольные значения. Формазан
Показатели общей активности АОФС в экспериментальных исследованиях
Группы Орган. Общая активность А 0 Ф С
римента тура НАДФ-Д % к К КТ-ПО % к К
порт 1.232 0.661 2.298
балки 0.959 1.210 2.289
К ц. вена 0.635 1.085 2.197
миокард 0.563 0.452 2.034
почки 1.198 1.239 2.061
порт 0.683 55.4 0.482 72,9 2.072 90,2
балки 0.678 70,7 0.474 39,2 1.865 81,5
ООЭ ц. вена 0.445 70,1 0.433 39.9 2.072 94,3
миокард 0.237 42.1 0.285 63,1 1.964 96,6
почки 0.644 53.8 0.697 56,3 2.118 102,8
порт 0.335 27.2 0.593 89.7 1.765 76,8
балки 0.237 24.7 0.587 48,5 1.765 76,8
ХИЭ ц.вена 0.212 33,4 0.559 51,5 1.768 70,1
миокард 0.215 38.2 0.383 84,7 2. 071 101,8
почки 0.289 24.1 0.432 34.9 1.986 96,4
порт 0.660 53.6 0.364 55,1 2.069 90,0
балки 0.538 56.1 0.368 30,4 2.073 90,6
оэ+хиэ ц. вена 0.415 65.4 0.341 31.4 2.107 95,9
миокард 0.198 35.2 0.228 50,4 1.954 96,1
почки 0.597 49.8 0.512 41.3 2.061 100,0
-К -(XX? -Т— хиэ — оэ+хиэ |
Рис.1. Общая активность АДГ при остром отравлении этанолом (003). хронической интоксикации этанолом (ХИЭ). отравлении на фоне хронической алкоголизации С0Э*ХИЭ) и в контрольной (К) группах эксперимента.
низкой ОП превышает показатели высокой в 7.4 - 7.О - 6.1 раза в структурах печени, в 4,7 - в миокарде, в 6,7 - в почках. Характерен небольшой диапазон колебаний АДГ, что наглядно демонстрирует графическое моделирование (рис.1). где кривая линейной зависимости, приближается по горизонтали к прямой линии, имеющей немного приподнятые начальный и конечный отрезки на уровне отметок печеночных портальных трактов и почек.
При отравлении на Фоне ХИЭ значения АДГ печени, по сравнению с хронически алкоголизированными животными, возрастают вдвое и приближаются к таковым в группе 00Э. Активность от 1-й
к 3-й зонам ацинусов печени, как в контроле и в группе ХИЭ. пропорционально снижается, что наглядно демонстрирует график линейной зависимости (рис.1). Соответствующая данной группе эксперимента кривая сходна с графическим изображением АДГ у контрольных животных, однако их различают гораздо меньшие значения общей активности и более резкое снижение фермента в миокарде. Формазан низкой ОП больше продукта высокой в 5,9 - 7.6 -7,6 раза, в миокарде - в 5,4. в почках - в 5,6 раза.
Постановкой гистохимических реакций на НАДФ-Д установлено, что при 00Э отмечается выраженное падение общей активности - в сравнении с контролем в 1-3 зонах ацинусов печени значения составляют 72,9%-39,2%-39,9% (табл.2). Таким образом, фермента существенно снижается у центральных вен и в гепатоцитах печеночных балок при небольшом уменьшении в зоне портальных трактов. В контроле же регистрируется резкое повышение НАДФ-Д в балках печени и у центральных вен. Распределение в ацинусах имеет небольшие колебания, что на графике (рис.2) выражается в виде близкой к горизонтальной почти прямой линии, слегка опускающейся к отметке центральной вены. В контрольной же группе кривая активности НАДФ-Д резко поднимается вверх от отметки портальных трактов к печеночным балкам, немного опускаясь затем к значению центральной вены. Сохраняется тенденция к слабому нарастанию формазана низкой ОП от 1 к 3 зонам ацинусов. причем продукт низкой плотности превышает значения высокой в 3,1 -3,5-4.2 раза. В контроле же это соотношение иное: 3.5 - 1.4 - 2.1. НАДФ-Д миокарда снижена, по сравнению с контролем. на 36,9%; формазан низкой ОП превышает значения продукта высокой в 4.5 раза (в контроле - в 1.6 раза). Общая активность НАДФ-Д почек снижена почти вдвое - на 43,7%; формазан высокой ОП меньше продукта высокой плотности в 4,4 раза (в контроле -в 1.4 раза). Графически показатели НАДФ-Д миокарда и почек имеют вид обращенного вершиной вниз угла, близкого к прямому, левая сторона которого образована отрезком кривой, плавно опускающимся к отметке миокарда, а правая - резко поднимающимся к отметке почки. Это отличает линейную зависимость при 00Э от графика контроля, для которого характерен очень острый угол
I — к -РОЭ — хиэ — оэ+хиэ |
Рис. 2. Общая активность НШ-Д при остром отравлении этанолом (003), хронической интоксикации этанолом (ХИЭ), отравлении на фоне хронической алкоголизации (ОЭ+ХИЭ) и в контрольной (К) группах эксперимента.
с круто опускающимся отрезком кривой к отметке, миокарда и столь же резко поднимающимся к значению НАДФ-Д почки (рис.2).
В группе ХИЭ НАДФ-Д печени и миокарда снижается меньше, превосходя значения 003; характерно резкое (в 3 раза) снижение НАДФ-Д почек. Как и в группе ООЭ, от 1 к 3 зонам ацинусов значения формазана снижаются незначительно. Колебания в распределении продукта реакции высокой и низкой 0П в зонах печеночных ацинусов выражено нерезко, однако, по сравнению с группой контроля, плотный формазан равномерно снижен - в 1,7 - 1,8 -1,8 раза. Формазан низкой 0П превышает продукт высокой в 6,6 -
3.6 - 4,6 раза. На графике (рис.2) линейное выражение общей активности НАДФ-Д имеет вид близкой к горизонтали почти прямой линии, слегка опускающейся к отметке показателя центральной вены. Далее отрезок кривой плавно снижается к значению НАДФ-Д миокарда, слегка поднимаясь к отметке почки. Таким образом, графическое изображение активности НАДФ-Д при экспериментальной ХИЭ сходно с таковым при ООЭ, однако отличается более высокими количественными показателями и видом концевого отрезка кривой в связи с резко пониженным значением фермента в почках.
При отравлении на Фоне ХИЭ НАДФ-Д снижена наиболее значительно. По сравнению с контролем, в зонах ацинусов печени это выражается как 55,1%- 30,4/5-31,4%. в миокарде - 50,4%. в почках - 41,355. Содержание формазана, как и в группах ООЭ и ХИЭ. практически одинаковое в гепатоцитах портальных трактов и балок печени, несколько снижается у центральных вен - на 6,3%. Продукт низкой плотности превышает показатели высокой в печени в 5,3 - 4.4 - 5.8 раза, в миокарде в 6. в почках - в 2,4 раза. Графическое выражение общей активности НАДФ-Д сходно с таковым при ООЭ, отличаясь более низким расположением кривой, адекватным резко сниженным количественным показателям (рис.2).
Гистохимические реакции на КТ-ПО показывают, что при ООЭ общая активность в ацинусах печени несколько снижена, составляя к контролю 90.255-81.456-90. 2% (табл.2). Таким образом, при равных цифровых значениях продукта в гепатоцитах портальных трактов и области центральных вен отмечается умеренное его снижение в клетках печеночных балок. В структурах ацинусов значение продукта низкой ОП больше, чем высокой, в 3,2 - 4.9 -4,0 раза (в контроле - 3,2 - 3,6 - 5,3 раза). КТ-ПО - активность миокарда немного (на 7,2%) ниже, чем печени. Доля продукта высокой плотности практически не отличается от контроля, он относится к низкой ОП как 1:3,3 и 1:3,4 соответственно. Активность КТ-ПО почек незначительно ниже контроля. Графическое моделирование активности КТ-ПО показывает, что. в отличие от других групп эксперимента, кривая при ООЭ имеет вид сходящихся под тупыми углами отрезков. Два угла, по уровню соответствующие снижению КТ-ПО в гепатоцитах балок печени и в миокарде.
порт балки ааена ииокард почка -К -003 ------ ХИЭ ---ОЭ+ХИЭ
Рис.3. Общая активность КТ-ПО при остром отравлении этанолом (003). хронической интоксикации этанолом (ХИЭ), отравлении на фоне хронической алкоголизации (ОЭ+ХИЭ) и в контрольной (К) группах эксперимента.
обращены вершинами вниз; третий, отражающий повышение фермента в области центральных вен печени - вверх (рис.3). Конец кривой представлен умеренно поднимающимся к отметке почки отрезком. У контрольных же животных КТ-ПО на графике отражается как слегка изогнутая вверх линия, плавно опускающаяся к отметке миокарда и едва заметно поднимающаяся к значению почки.
ХИЭ приводит к более выраженному снижению общей активности КТ-ПО печени - на 23,2%-22.935-29,9% по сравнению с контролем, с выравниванием значений в ацинусах. Характерным является прогрессивное уменьшение (в 2 раза к контролю) оптически плот-
ных форм продукта реакции и резкий рост продукта самой низкой ОП. который занимает 53,3%-49,655-50,7% (в контроле -30,2%-31,055-38.1%). Значения низкой ОП превышают продукт высокой в 7.7-5.3-7,8 раза. В миокарде активность КТ-ПО на 1.8% превосходит показатель контроля и на 17,1-17,3% - значения в печени, чего не наблюдается ни в остальных группах эксперимента. ни в других АОФС; обращает внимание сохранение большой доли продукта высокой ОП - 20,9% - почти как в контроле. Соотношение между продуктами высокой и низкой ОП ненамного отличается от контрольного и составляет 1:3,8. КТ-ПО почек немного снижена; соотношение между значениями продукта реакции высокой и низкой ОП выражается как 1:4,8. На графике активность КТ-ПО представлена горизонтальной прямой линией на уровне значений зон ацинусов печени, которая круто поднимается вверх к отметке миокарда, несколько снижаясь к значению почки (рис.3).
Введение алкоголя на Фоне ХИЗ. по сравнению с предыдущей группой, приводит к повышению КТ-ПО на 17-19%. Изучение табл.2 показывает, что в целом морфометрические показатели этой группы несущественно отличаются от 00Э. Характерным является стабилизация КТ-ПО во структурах ацинусов печени. Обращает также внимание, по сравнению с ХИЭ, отчетливая тенденция к повышению более плотных Форм продукта реакции, который прогрессивно нарастает от 1 к 3 зоне ацинусов печени : И. 4%-20,155-27.0%. Значения плотного продукта в области центральных вен были выше показателей всех других групп эксперимента как в данной, так в любой другой зоне ацинусов. Значения низкой ОП превышают продукт высокой в 7,8 - 4.0 - 2.7 раза. Активность фермента в миокарде ниже контроля только на 3,9%, практически равна показателям КТ-ПО печени в своей группе; соотношение между значениями высокой и низкой ОП выражается как 1:3,3. Не отличается от печени в этой группе и от контрольных значений активность КТ-ПО почек; соотношение в них высокой и низкой ОП выражается как 1:3,0. Графическое отображение линейной зависимости общей активности КТ-ПО имеет вид близкой к горизонтали почти прямой линии, слегка возвышающейся к отметке показателя центральной вены (рис.3). Далее отрезок кривой плавно снижается к значению
КТ-ПО миокарда, слегка поднимаясь к отметке почки.
Патоморфологические. газохроматографические и гистохимические критерии судебно-медицинской диагностики.
Анализ обнаруженных в ходе судебно-медицинских экспертиз патоморфологических проявлений в печени (табл.3) показывает, что полнокровие центральных вен встречается во всех группах погибших более чем в половине случаев, за исключением быстрой смерти от ЧМТ (44%); наиболее часто оно выявляется при отравлении этанолом (ОЭ) - 74% и механической асфиксии - 67%. Полнокровие меадольковых (портальных) вен имеет место в половине наблюдений при смерти от отравлений и механической асфиксии -51% и 50% соответственно, в 44% оно обнаружено в случае смертельной механической травмы. Относительно редко (18%) этот признак отмечается в группе скоропостижно умерших от ИБС.
Частота встречаемости патоморфологических проявлений в печени
л/и Морфологические Частота встречаемости(%)
п/п признаки ОЭ АКМП ИБС ЧМТ МА
1. Полнокровие центральных вен 74 50 59 44 67
2. Мутность, зернистость цитоплазмы 72 50 12 30 17
3. Полнокровие междольковых вен 51 25 18 41 50
4. Жировая вакуолизация 40 63 18 4 17
5. Зернисто-жировая дистрофия 21 25 12 4 17
6. Дискомплексация балок 19 ■ - 6 4 17
7. Разрастание соединительной ткани 5 - 24 И -
8. Портальный цирроз 2 - - - -
Мутность, зернистость цитоплазмы гепатоцитов найдена в 72% отравлений алкоголем и в 50% случаев смерти от АКМП. Жировая мелкокапельная вакуолизация и зернисто-жировая дистрофия пече-
ни зарегистрированы в 63% и 25% при АКМП, 40% и 21% отравлений этиловым спиртом; гораздо реже этот признак встречается при смерти от других причин. Разрастание соединительной ткани диагностировано в 1/4 случаев смерти от ИБС. в 11% травмы и только в 5% отравлений; сформировавшийся же портальный цирроз печени отмечен только в 1 случае - при отравлении этанолом, в одном наблюдении (группа ИБС) - на стадии формирования.
В таблице 4 перечислены обнаруженные при судебно-гистологи-ческом исследовании патологические проявления в миокарде. Первое место в ней занимает зернистость и мутность цитоплазмы, встретившаяся при смерти от АКМП в 88%. от ОЭ и ИБС - в 63% случаев. На втором месте - очаговый диффузный атеросклероз -по 53% в группах ОЭ и ИБС. 38% - при АКМП. Почти в половине наблюдений отмечены : фрагментация мышечных волокон (47 -50%). расширение и полнокровие вен (44 - 50%). неравномерная окраска ядер (40 - 50%). Значительно реже в этих группах имеют место гипертрофия кардиомиоцитов (21 - 25%). отек стромы мио-
Частота встречаемости патоморфологических проявлений в миокарде
N/N Морфологические Частота встречаемости